|
|
Vypracování a zavedení metodiky na stanovení osových proteinů
Hruzík, Ondřej ; Buňka, František (oponent) ; RNDr.Karel Gebauer (vedoucí práce)
Osový protein agrekanu má významný podíl na správnou funkci kloubní chrupavky. Jeho nedostatek nebo strukturální porušení může být příčinou její nedostatečné funkce. Pro studium produkce agrekanu byla použita kultura chondrocytů získaná z vepřové kloubní chrupavky. Jednovrstevná kultivační metoda poskytuje modelový systém, který umožnil sledovat produkci agrekanu do růstového média. Syntéza agrekanu byla v médiu stimulována přídavkem L-methioninu, L-serinu a seleničitanu sodného pentahydrátu. Methionin a serin jsou prekurzory sirné aminokyseliny cysteinu, jejíž role je pro správnou funkci osového proteinu nezastupitelná. Zvýšený obsah cysteinu by mohl nasvědčovat zvýšené produkci osového proteinu. Růstová média a chondrocyty byly po kyselé nebo oxidativní hydrolýze analyzovány pomocí automatického analyzátoru aminokyselin. Analýzou bylo určeno aminokyselinové zastoupení. Hlavní pozornost byla věnována cysteinu. Měnící se koncentrace této aminokyseliny nám ukazovala, zda jsou prekurzory v přídavku využity na její tvorbu a tedy zda je možné těmito prekurzory produkci osového proteinu stimulovat. Výsledky jsou diskutovány v závěru práce. Dalším krokem by mělo být zjištění koncentrace syntetizovaného agrekanu imunologickou metodou. V současné době je tato metoda finančně velmi náročná, proto byla zvolena pro první orientační testy metoda stanovení produkce osového proteinu agrekanu pomocí vhodné aminokyseliny.
|
|
|
Matching the role of chondroitin sulphate proteoglycan, aggrecan, in dense extracellular matrix of perineuronal nets and glial scar
Gmiterková, Lenka ; Růžička, Jiří (vedoucí práce) ; Telenský, Petr (oponent)
Traumatické poranenia mozgu a miechy sú celosvetovým zdravotníckym problémom. V poškodenom tkanive dochádza k zmenám na úrovni buniek aj medzibunkovej hmoty, kvôli čomu vzniká jazva. Zmena, ku ktorej dochádza v tkanive na mieste jazvy znemožňuje obnovu poškodených neurónov. Podobne ako jazva, ktorá bráni v nervovej plastickosti po poranení, funguje v nepoškodenom mozgu perineuronálna sieť. Jedným z kľúčových prvkov perineuronálnych sietí a jaziev v centrálnej nervovej sústave je proteoglykán agrekán. V tejto práci som sa zamerala na funkciu agrekánu v mozgu a mieche. Najmä na mechanizmus, ktorým bráni rastu neurónov a takisto na výskum v oblasti liečby týchto poranení. Táto téma je dôležitá, pretože momentálne neexistuje štandardná liečba, ktorá by obnovovala rast neurónov na mieste vytvorenej jazvy.
|
|
|
The effect of structural changes in perineuronal nets and deep cooling on synaptic plasticity and memory of tauopathy mice
Šafránková, Kristýna ; Růžička, Jiří (vedoucí práce) ; Telenský, Petr (oponent)
Tauopatie je neurodegenerativní onemocnění charakteristické jak ztrátou neuronů, tak synapsí. Ztráta neuronů je ireverzibilní s velmi malou šancí funkční substituční terapie. Ztracené synapse však lze obnovit pomocí správné stimulace. Perineuronální sítě (PNNs) slouží jako ochranná bariéra neuronů, zárověň ale významně snižují jejich synaptickou plasticitu. Dočasné enzymatické rozštěpení struktury PNNs může vést k opětovnému zapojení synapsí a zlepšení procesu paměti a učení. Model chladem vyvolané plasticity vede k odpřažení signifikantního počtu synapsí v mozku. Následné obnovení synapsí bylo pozorováno jak u zdravých tak i nemocných zvířat a navíc došlo ke spuštění neuroprotektivních mechanismů vyvolaných exprimací proteinů studeného šoku (CSP). Tato diplomová práce je zaměřena na výše zmíněné formy modelů synaptické plasticity; umělé remodelace perineuronálních sítí a model synaptické plasticity vyvolané chladem. Oba tyto modely budou použity jako nástroj pro modulaci procesů paměti a učení u modelu P301S Tauopatie u myší. Práce se zaměří na změny v počtu synapsí v oblasti CA1 hipokampu, na změny hladin synaptických proteinů na úrovni celého hipokampu a na behaviorální změny předem trénovaného úkolu dlouhodobé paměti závislého na dorzálním hipokampu. Klíčová slova: perineurální sítě, agrekan,...
|
|
|
The effect of structural changes in perineuronal nets and deep cooling on synaptic plasticity and memory of tauopathy mice
Šafránková, Kristýna ; Růžička, Jiří (vedoucí práce) ; Telenský, Petr (oponent)
Tauopatie je neurodegenerativní onemocnění charakteristické jak ztrátou neuronů, tak synapsí. Ztráta neuronů je ireverzibilní s velmi malou šancí funkční substituční terapie. Ztracené synapse však lze obnovit pomocí správné stimulace. Perineuronální sítě (PNNs) slouží jako ochranná bariéra neuronů, zárověň ale významně snižují jejich synaptickou plasticitu. Dočasné enzymatické rozštěpení struktury PNNs může vést k opětovnému zapojení synapsí a zlepšení procesu paměti a učení. Model chladem vyvolané plasticity vede k odpřažení signifikantního počtu synapsí v mozku. Následné obnovení synapsí bylo pozorováno jak u zdravých tak i nemocných zvířat a navíc došlo ke spuštění neuroprotektivních mechanismů vyvolaných exprimací proteinů studeného šoku (CSP). Tato diplomová práce je zaměřena na výše zmíněné formy modelů synaptické plasticity; umělé remodelace perineuronálních sítí a model synaptické plasticity vyvolané chladem. Oba tyto modely budou použity jako nástroj pro modulaci procesů paměti a učení u modelu P301S Tauopatie u myší. Práce se zaměří na změny v počtu synapsí v oblasti CA1 hipokampu, na změny hladin synaptických proteinů na úrovni celého hipokampu a na behaviorální změny předem trénovaného úkolu dlouhodobé paměti závislého na dorzálním hipokampu. Klíčová slova: perineurální sítě, agrekan,...
|
|
|
Matching the role of chondroitin sulphate proteoglycan, aggrecan, in dense extracellular matrix of perineuronal nets and glial scar
Gmiterková, Lenka ; Růžička, Jiří (vedoucí práce) ; Telenský, Petr (oponent)
Traumatické poranenia mozgu a miechy sú celosvetovým zdravotníckym problémom. V poškodenom tkanive dochádza k zmenám na úrovni buniek aj medzibunkovej hmoty, kvôli čomu vzniká jazva. Zmena, ku ktorej dochádza v tkanive na mieste jazvy znemožňuje obnovu poškodených neurónov. Podobne ako jazva, ktorá bráni v nervovej plastickosti po poranení, funguje v nepoškodenom mozgu perineuronálna sieť. Jedným z kľúčových prvkov perineuronálnych sietí a jaziev v centrálnej nervovej sústave je proteoglykán agrekán. V tejto práci som sa zamerala na funkciu agrekánu v mozgu a mieche. Najmä na mechanizmus, ktorým bráni rastu neurónov a takisto na výskum v oblasti liečby týchto poranení. Táto téma je dôležitá, pretože momentálne neexistuje štandardná liečba, ktorá by obnovovala rast neurónov na mieste vytvorenej jazvy.
|
|
|
Vypracování a zavedení metodiky na stanovení osových proteinů
Hruzík, Ondřej ; Buňka, František (oponent) ; RNDr.Karel Gebauer (vedoucí práce)
Osový protein agrekanu má významný podíl na správnou funkci kloubní chrupavky. Jeho nedostatek nebo strukturální porušení může být příčinou její nedostatečné funkce. Pro studium produkce agrekanu byla použita kultura chondrocytů získaná z vepřové kloubní chrupavky. Jednovrstevná kultivační metoda poskytuje modelový systém, který umožnil sledovat produkci agrekanu do růstového média. Syntéza agrekanu byla v médiu stimulována přídavkem L-methioninu, L-serinu a seleničitanu sodného pentahydrátu. Methionin a serin jsou prekurzory sirné aminokyseliny cysteinu, jejíž role je pro správnou funkci osového proteinu nezastupitelná. Zvýšený obsah cysteinu by mohl nasvědčovat zvýšené produkci osového proteinu. Růstová média a chondrocyty byly po kyselé nebo oxidativní hydrolýze analyzovány pomocí automatického analyzátoru aminokyselin. Analýzou bylo určeno aminokyselinové zastoupení. Hlavní pozornost byla věnována cysteinu. Měnící se koncentrace této aminokyseliny nám ukazovala, zda jsou prekurzory v přídavku využity na její tvorbu a tedy zda je možné těmito prekurzory produkci osového proteinu stimulovat. Výsledky jsou diskutovány v závěru práce. Dalším krokem by mělo být zjištění koncentrace syntetizovaného agrekanu imunologickou metodou. V současné době je tato metoda finančně velmi náročná, proto byla zvolena pro první orientační testy metoda stanovení produkce osového proteinu agrekanu pomocí vhodné aminokyseliny.
|
host ::
RSS.